微生物氣溶膠是指懸浮在空氣中的微生物形成的膠體體系。自然界中含有大量微生物氣溶膠,以粒徑為0.1~20.0μm的微生物氣溶膠與人類健康關(guān)系密切??諝庵形⑸餁馊苣z的采樣方法種類繁多,常用的有自然沉降類、撞擊類和沖擊類。
1、自然沉降法
自然沉降法是1881年由德國細菌學家Koch建立的,它是讓測定區(qū)域空氣中的微生物氣溶膠顆粒由于重力作用,在一定時間內(nèi)逐步沉降到帶有培養(yǎng)介質(zhì)平板內(nèi)的一種采樣方法。自然沉降法是空氣中微生物氣溶膠采集常用的方法之一,我國的醫(yī)療衛(wèi)生機構(gòu)在調(diào)查空氣中微生物氣溶膠的分布和粒譜時也常常選擇自然沉降法,因為它使用方便,操作簡單,經(jīng)濟,能夠初步了解某環(huán)境空氣中細菌的污染狀況。
自然沉降法的主要缺點:
奧梅梁斯基公式具有局限性。奧梅梁斯基公式,即C=50000 N/AT(C為細菌濃度(cfu/m3),N為培養(yǎng)后平板上的菌落數(shù), A為平板面積(cm2),T為暴露時間(min)),該公式忽略了顆粒大小這一基本因素。
短時間內(nèi)難以測出空氣中粒徑較小的微生物氣溶膠。通常認為5μm以下的顆粒是空氣傳播疾病的危險顆粒。自然沉降法一般只能采集到>8μm的微生物氣溶膠,對于<5μm的微生物氣溶膠采樣效率不高。
外界氣流易對采樣結(jié)果造成影響。在實踐過程中很難控制采樣條件,而自然沉降法采樣條件要求靜止無風,所以容易造成同一環(huán)境的多次采樣結(jié)果有偏差。
2、撞擊法
撞擊法是指空氣中微生物氣溶膠顆粒獲得足夠的慣性后,脫離氣流撞擊于固體平板上的一種采樣方法,這類采樣器能作空氣微生物的定量測定。
固體撞擊式采樣器較常見的是安德森(Andersen)采樣器。Andersen采樣器是一種6級篩板式空氣微生物采樣器,通過模擬人體呼吸道的結(jié)構(gòu)及空氣動力學特征進行采樣。Andersen采樣器由6個帶有400個微細圓形孔的金屬撞擊圓盤組成,每個圓盤的圓孔孔徑由上到下遞減,而氣流速度則由上到下遞增,盤下放置裝有培養(yǎng)基的平板,使空氣微生物氣溶膠顆粒按其大小逐級撞擊在6層培養(yǎng)基平板上。
Andersen采樣器各級捕獲的微粒直徑為:第1級>7.0μm;第2級4.7~7.0μm;第3級3.3~4.7μm;第4級2.1~3.3μm;第5級1.1~2.1μm;第6級0.65~1.1μm。
Andersen采樣器的優(yōu)點:
生物失活率低,存活率高。
敏感性高。由于Andersen采樣器采樣流量不大, 并且能夠讓采集到的活性顆粒立即進入有利于繁殖的條件。
采集粒譜范圍寬。Andersen采樣器可采集粒徑在0.2~20μm范圍內(nèi)的微生物氣溶膠
采樣效率高。在適宜的采樣范圍內(nèi),Andersen采樣器效率非常高,尤其是采集空氣中的感染顆粒,即呼吸道易沉著顆粒。
操作簡單,適宜范圍廣泛。
Andersen采樣器的缺點:
容易引起誤差,因為存在壁損失,顆粒從采集面滑脫和被打碎等。此外,Andersen采樣器不適用于壓力敏感型微生物,同時采樣步驟較為繁雜,所需營養(yǎng)瓊脂平板也較多。
3、沖擊法
沖擊式采樣器中常用的是液體沖擊式采樣器Porton采樣器。
Porton采樣器是由英國生物研究中心Porton制造的,它使用方便、價格低廉、易消毒、可以反復(fù)使用、有效地延伸了采樣器的檢測范圍,適用于高濃度的空氣微生物采樣。此外,采樣液的保護作用使得Porton采樣器可以采集到脆弱的微生物,如病毒和立克次氏體的采樣。由于采樣器采集的是液體樣本,使用者可以隨時對樣本進行檢測,了解空氣中微生物的構(gòu)成,測出空氣中活微生物數(shù)量。
Porton采樣器采集的是液體樣本,所以可以同時進行多種實驗,選用不同的測定方法分別分析。此外,可以加入適宜的營養(yǎng)液或保存液于液體樣本中,使微生物能長期保存。
Porton采樣器的缺點:
適宜進行長時間采樣。不適宜現(xiàn)場多次采樣。不適宜
不適宜現(xiàn)場多次采樣。在低溫條件下不適宜采樣。因為采樣生物中生長,
在低溫條件下不適宜采樣。因為采樣液溫度過低不利于微生物在液體中生長,采樣液的適宜溫度在10~20 ℃之間。
對于低濃度的微生物采樣很難檢測。